4-Nitrofenil beta-D-galaktopiranosidoa CAS: 200422-18-0

Efektua: ONPG β-galaktosidasa entzimaren presentzia eta jarduera detektatzeko bereziki erabiltzen den substratua da.β-galaktosidasa entzima presente eta aktibo dagoenean, ONPG bi produktutan zatitzen du: o-nitrofenola eta galaktosa deribatu bat.O-nitrofenolaren askapenak kolore horia aldatzen du, eta espektrofotometro baten bidez neur daiteke.

Aplikazioa: ONPGk hainbat aplikazio ditu biologia molekularra eta biokimika ikerketan:

β-galaktosidasa aktibitatearen zehaztapena: ONPG normalean β-galaktosidasa entzimaren jarduera neurtzeko eta kuantifikatzeko erabiltzen da.O-nitrofenolaren eraketa-tasa, entzimaren jarduerarekin zuzenean proportzionala dena, espektrofotometrikoki neur daiteke.

Geneen adierazpena eta erregulazioa: ONPG sarritan erabiltzen da geneen adierazpen eta erregulazio ikasketekin lotutako esperimentuetan.Maiz erabiltzen da fusio-proteinen saiakuntzetan, hala nola, normalean erabiltzen den lacZ fusio-sisteman, sustatzaile espezifikoen kontrolpean geneen adierazpena aztertzeko.ONPG erabiliz neurtutako beta-galaktosidasaren jarduerak gene-adierazpen-mailaren inguruko argibideak ematen ditu.

β-galaktosidasa-jardueraren baheketa: ONPG baheketa-metodo kolorimetriko gisa erabil daiteke DNA birkonbinatuaren teknologian, β-galaktosidasa kodetzen duen LacZ genearen presentzia eta funtzionaltasuna identifikatzeko.Baheketa-metodo honek interesgarria den genea duten klonak identifikatzen laguntzen du.

Entzimaren zinetika-azterketak: ONPG ere erabilgarria da β-galaktosidasa entzimaren zinetika aztertzeko.Substratu-kontzentrazio desberdinetan entzima-substratu erreakzio-abiadura neurtuz, Michaelis-Menten konstanteak (Km) eta erreakzio-abiadura maximoak (Vmax) bezalako parametro zinetikoak zehaztea posible da.