Gure inguruan kantatu gabeko heroi asko daude, arruntak diruditenak, baina egia esan isilean asko laguntzen digute.Proteinasa K diagnostiko molekularren industrian "erroi ezezaguna" da, nahiz eta industriako "handien eta indartsuarekin" alderatuta, K proteinasa hain baxua den, ezen aspalditik ahaztu dugun bere garrantzia.Koroaren epidemia berriaren agerraldiarekin, K proteinasaren eskariak gora egin du, eta etxeko eta atzerriko eskaintza kontsumoaren urrun dago, eta denak bat-batean konturatu ziren K proteinasa oso garrantzitsua dela.
Zertarako balio du proteinasak K?
Proteinasa K serina proteasa da entzima proteolitikoen aktibitatea duena eta aktibitatea mantendu dezake ingurune ugaritan (pH (4-12,5), gatz handiko tampona, 70 °C-ko tenperatura altua, etab.).Gainera, K proteinasaren jarduera ez da SDS, urea, EDTA, guanidina klorhidratoa, guanidina isotiozianatoa eta abar inhibitzen, eta detergente kopuru jakin batek proteinasaren K jarduera ere hobe dezake. Medikuntza tratamenduan (birusa eta mikrobioen desinfekzioa). ), elikagaiak (haragia samurtzea), larrua (ilea leuntzea), ardogintza (alkohola argitzea), aminoazidoen prestaketa (lumak degradatuak), azido nukleikoen erauzketa, in situ hibridazioa, etab., proteinasa K Aplikazioak daude.Gehien erabiltzen den aplikazioa azido nukleikoen erauzketa da.
K proteinasak laginaren mota guztietako proteinak entzimolizatu ditzake, azido nukleikoei estuki lotuta dauden histonak barne, horrela azido nukleikoak lagintik askatu eta erauzketan askatu ahal izateko, erauzketa eta arazteko hurrengo urratsa erraztuz.Azido nukleiko birikoaren detekzioan, K proteinasa birusaren laginketa-soluzioko osagai garrantzitsuenetako bat da.K proteinasak birusaren estalkiaren proteina pitzatu eta desaktibatu dezake, hau da, garraio eta detekzio fasean seguruagoa dena;gainera, K proteinasak RNasak ere degradatu dezake RNA birikoaren degradazioa saihesten du eta azido nukleikoa detektatzeko errazten du.
K proteinasaren gaueko ospea
Ikerketa zientifikoaren alorrean edo IVD arloan, azido nukleikoen erauzketa da esperimenturik oinarrizkoena, beraz, K proteinasa beti izan da oso existentzia garrantzitsua.Hala ere, iraganean, K proteinasa bere eginkizuna baino askoz ere ezezaguna zen.Horren zati handi bat K proteinasaren eskaintza eta eskaera harremana oso egonkorra zelako izan zen.Inor gutxik pentsatuko luke K proteinasaren horniketa arazo bat izango litzatekeela.
Koroaren epidemia berriaren agerraldiarekin, azido nukleikoen probak egiteko eskaerak gora egin du.2020ko ekainaren amaieran, Txinak ia 90 milioi koroa proba berri egin ditu, eta kopuru hori are kezkagarriagoa da mundu mailan.Azido nukleikoen erauzketa esperimentuetan, K proteinasaren lan-kontzentrazioa 50-200 μg/mL ingurukoa da.Orokorrean, 100 μg proteinasa inguru behar dira azido nukleiko lagin bat ateratzeko.Benetako erabileran, azido nukleikoaren erauzketaren eraginkortasuna areagotzeko, askotan K proteinasa kantitate handiagoan erabiliko da.Koronabirus berriaren azido nukleikoak detektatzeak K proteinasaren eskaera handia ekarri du.K proteinasaren jatorrizko eskaintza eta eskariaren oreka azkar hautsi zen, eta K proteinasa epidemiaren prebentziorako material garrantzitsu bihurtu zen egun batetik bestera.
K proteinasa ekoizteko zailtasunak
Epidemiaren garapenarekin K proteinasaren balio garrantzitsua jendeak baloratu badu ere, lotsagarria da K proteinasaren gehiegizko baxua dela eta, etxeko enpresa gutxik parte hartu izana proteinasa K ekoizten denean. proteinasa K ekoizpena ezarri nahi Ekoizpen prozesuan zehar, proteinasa K proteina oso berezia dela aurkitu zen.Oso zaila da proteinasaren K ekoizteko ahalmena denbora laburrean zabaltzea.
K proteinasaren eskala handian ekoizteak honako zailtasun hauek ditu
1. Adierazpen baxua
K proteinasak proteina gehienak ez-espezifikoki degrada ditzake eta toxikotasun larria eragin dezake adierazpen-zelula ostalariarengan.Beraz, K proteinasaren adierazpen maila oso baxua da orokorrean.K proteinasa oso adierazten duten espresio-sistemen eta anduien baheketak, oro har, ziklo luzeagoa behar du.
2. Pigmentuen eta azido nukleikoen hondakinak
Eskala handiko hartzidurak pigmentu eta ostalariaren azido nukleiko-hondakin kopuru handia sartzen du.Zaila da ezpurutasun horiek arazte prozesu sinple batekin kentzea, eta arazketa konplexuak kostua handitzen du eta berreskuratze-tasa murrizten du.
3. Ezegonkortasuna
K proteinasa ez da nahikoa egonkorra, bere burua entzimolizatu dezake eta zaila da denbora luzez 37 °C-tan egonkor gordetzea babes agenterik gabe.
4. Erraz prezipitatzen
K proteinasaren hauts liofilizatua prestatzerakoan, hauts liofilizatuan proteinasaren K eduki solidoa handia dela ziurtatzeko, beharrezkoa da liofilizatutako babes agente bat gehitzea kontzentrazio handian, baina K proteinasaren kontzentrazioa 20 mg/mL-ra eta gorakoa da, erraza da Agregazioak prezipitatu bat eratzen du, eta horrek zailtasun handiak ekartzen ditu solido-eduki handiko K proteinasa liozitzeko.
5. Inbertsio handia
K proteinasak proteasa aktibitate handia du eta beste proteasak hidroliza ditzake laborategian.Horregatik, proteinasak K ekoizpen-eremu, ekipamendu eta langile espezializatuak behar ditu ikerketarako eta garapenerako eta ekoizpenerako.
XD BIOCHEM-en proteinasa K disoluzioa
XD BIOCHEM-ek proteina espresio eta arazteko plataforma heldua du, eta esperientzia aberatsa du proteina birkonbinatuen adierazpen eta arazketan eta ekoizpen prozesuen optimizazioan.Ikerketa eta garapen talde baten eraketa azkarren bidez, K proteinasaren eskala handiko ekoizpen prozesua gainditu da.Hauts izoztuaren hileko irteera 30 KG baino gehiago da.Produktuak errendimendu egonkorra du, entzimaren jarduera espezifiko handia eta ostalariaren zitokromo eta azido nukleikoen hondakinik ez du.Ongi etorri XD BIOCHEM-ekin harremanetan jartzeko Lortu probako pakete bat (E-posta:sales@xdbiochem.comTel.: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM-en irtenbide teknikoen artean daude
Kopia anitzeko plasmidoen integrazioa erabiliz, 8g/L-ko adierazpen-maila duten espresio handiko anduiak aukeratzen dira, eta horrek K proteinasaren espresio maila baxuaren arazoa gainditzen du.
Urrats anitzeko arazketa prozesu bat ezarriz, ostalariaren zitokromoa eta K proteinasaren azido nukleikoen hondakinak arrakastaz kendu ziren balio estandarraren azpitik.
Tampon babesleen formulazioen errendimendu handiko baheketaren bidez, proteinasa K 37 °C-tan egonkorki gorde dezakeen tampon bat aukeratu zen.
Baheketa-buffer-ek proteinasa K kontzentrazio handietan gehitzen eta hauspeatzen erraza den arazoa gainditzen du, eta proteinasaren K-ren solido-eduki handiko liofilizaziorako oinarriak ezartzen ditu.
XD BIOCHEM proteinasa K lagina
XD BIOCHEM proteinasa K egonkortasun proba: ez da jarduera aldaketa nabarmenik izango giro-tenperaturan 80 d igaro ondoren
XD BIOCHEM proteinasa K egonkortasun-proba: ez da jarduera aldaketa nabarmenik izango giro-tenperaturan 80 d igaro ondoren.
XD BIOCHEM proteinasaren K eta lehiakide diren produktuen azido nukleikoaren erauzketa efektuaren konparazioa.Azido nukleikoen erauzketa prozesuan, XD BIOCHEM eta K proteinasa lehiakorra erabiltzen dira hurrenez hurren.XD BIOCHEM proteinasaren K erauzketa-eraginkortasuna handiagoa da eta xede genearen Ct balioa txikiagoa da.
Argitalpenaren ordua: 2021-12-31