Fenilgalaktosido CAS: 2818-58-8

Entzimen jardueran duen eragina: Fenilgalaktosidoa normalean erabiltzen da β-galaktosidasa entzimaren jarduera neurtzeko. Fenilgalaktosidoa β-galaktosidasak hidrolizatzen duenean, p-nitrofenola askatzen du. P-nitrofenolaren metaketa kuantitatiboki neur daiteke, β-galaktosidasaren jarduerari buruzko informazioa emanez. Efektu hau entzima-analisietan eta bahetze-sistemetan bezalako aplikazioetan aprobetxatzen da.

Geneen espresioaren analisia: Fenilgalaktosidoa askotan substratu gisa erabiltzen da biologia molekularreko esperimentuetan geneen espresioa aztertzeko. β-galaktosidasa kodetzen duen lacZ genea intereseko beste gene batzuen sekuentzia erregulatzaileekin fusionatzen da normalean. LacZ genearen espresioak eta β-galaktosidasak fenilgalaktosidoaren hidrolisiak aztertzen ari den genearen espresio-eredua eta maila adieraz dezakete.

Bahetze-sistemak: Fenilgalaktosidoa β-galaktosidasa jarduera erabiltzen duten bahetze-sistemen osagai garrantzitsua da. Adibide ezagun bat urdin-zuri bahetze-metodoa da, biologia molekularreko esperimentuetan zelula birkonbinatuak edo eraldatuak identifikatzeko erabiltzen dena. DNA birkonbinatua arrakastaz hartu duten edo birkonbinazio genetikoa jasan duten koloniek β-galaktosidasa adieraziko dute, fenilgalaktosidoaren hidrolisia eta kolore urdinaren eraketa eraginez.

Proteinen purifikazioa: Kasu batzuetan, fenilgalaktosidoa afinitate-kromatografiarako ligando gisa erabil daiteke, β-galaktosidasari lotzen zaizkion edo horrek aktibatzen dituen proteinak purifikatzeko. Intereseko proteinak afinitate-etiketa bat edo β-galaktosidasa lotzeko domeinu bat duen fusio-etiketa bat izan dezake. Proteina-nahasketa fenilgalaktosido immobilizatua duen zutabe batetik pasatuz, nahi den proteina selektiboki atxiki eta ondoren eluitu daiteke.